Imagerie cellulaire

Notre microscope BondXplorer™ et notre endoscope InSplorer™ offrent une très large gamme de modalités d’imagerie à haute résolution pour adresser les cellules individuellement dans la plupart des tissus biologiques.

Imagerie CARS du stratum corneum

Endoscope InSplorer

L’imagerie par diffusion Raman anti-Stokes cohérente (CARS) est un outil puissant qui permet de cibler des liaisons chimiques spécifiques. Elle présente un signal particulièrement fort pour les liaisons CH dans les lipides, autour de 2850 cm-1, ce qui la rend très utile pour l’imagerie cellulaire en raison de la membrane bicouche des cellules. Un exemple de ceci peut être vu dans l’imagerie d’un échantillon de peau de souris (spécifiquement, la couche de stratum corneum) en utilisant l’endoscope InSplorer™. La barre d’échelle représente ici 120 µm.

Imagerie SRS, 2P et SHG d’organoïdes

Microscope BondXplorer

Un organoïde est un modèle in vitro à base de cellules conçu pour reproduire certaines fonctions d’un organe. L’une des principales applications est le développement de médicaments. Notre microscope BondXplorer™ peut réaliser des images sur un organoïde à la fois par SRS et par contraste multiphotonique. Les quatre images présentées ici ont été enregistrées simultanément dans un échantillon d’organoïdes en utilisant le SRS des liaisons CH2 et CH3, l’épifluorescence à deux photons (2PEF) et la génération de seconde harmonique (SHG). L’échantillon d’organoïdes a été préalablement marqué avec un fluorophore. Les longueurs d’onde utilisées ici sont 792,5 nm pour la pompe, 1025 nm et 1034 nm pour les deux faisceaux Stokes. La barre d’échelle est de 50 µm.

Imagerie CARS et SHG de colon

Endoscope InSplorer

Nous avons réalisé de l’imagerie par diffusion Raman anti-Stokes cohérente (CARS) sur des biopsies du côlon humain pour mettre en évidence les lipides présents dans la membrane cellulaire. Les capacités multimodales de l’endoscope permettent également de visualiser les fibres de collagène à l’aide de l’imagerie par génération de seconde harmonique (SHG). La barre d’échelle représente 120 µm.

Imagerie CARS et 2P de la moelle épinière

Endoscope InSplorer

En exploitant la multimodalité de l’endoscope InSplorer™, nous sommes en mesure d’imager les cellules du système nerveux à l’intérieur d’une moelle épinière de souris. L’imagerie à deux photons (2P) nous permet de visualiser les axones spinaux, tandis que l’imagerie par diffusion Raman anti-Stokes cohérente (CARS) met en évidence les membranes de myéline. La barre d’échelle représente 120 µm.

Imagerie 2P et SHG de cartilage

Endoscope InSplorer

L’image présentée ici est un exemple d’imagerie de fluorescence à deux photons appliquée à l’imagerie cellulaire, en particulier dans le cas d’un échantillon de cartilage hyalin coloré à l’éosine. Grâce aux mécanismes non linéaires intrinsèques de notre endoscope, nous sommes en mesure de fournir simultanément la génération de seconde harmonique (SHG) et l’imagerie à deux photons. Dans ce cas, elle met en évidence les fibres de collagène en plus des cellules. La barre d’échelle est de 60 µm.

Imagerie 2P de cornée d’insecte

Endoscope InSplorer

L’image de droite présente une vue endoscopique d’une cornée d’insecte, montrant la forme hexagonale caractéristique des cellules endothéliales de la cornée. La barre d’échelle de cette image représente 60 µm.

Imagerie 3P de tissu dégraissé

Endoscope InSplorer

L’endoscope InSplorer™ utilise une fibre qui délivre des impulsions laser courtes à un échantillon sans élargissement temporel. Cette caractéristique permet d’obtenir une puissance crête élevée sur les échantillons, ce qui facilite l’utilisation de l’imagerie à trois photons (3P). Les avantages de l’imagerie 3P sont notamment une meilleure résolution, et de plus grands sectionnement optique et profondeur de pénétration. L’application de l’imagerie 3P à l’imagerie des adipocytes dans un tissu dégraissé en est un exemple. La barre d’échelle de cette image est de 35 µm.